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细胞培养与转染适应性数据库/细胞因子精要概览


细胞种类筛选器

细胞系

原代细胞

WI-38 Cells

  • 种属
  • 组织来源肺脏
  • 形态学特征成纤维样细胞
  • 培养特性贴壁生长           
推荐培养条件:MEM+10%FBS

细胞传代培养步骤T-75培养瓶

1.移除并弃掉培养液。
2.用0.25%胰蛋白酶/0.53 mM EDTA溶液冲洗细胞层,以除去含胰蛋白酶抑制剂的痕量血清。
3.向培养瓶中加入2.0-3.0 mL胰蛋白酶EDTA溶液,并在倒置显微镜下观察细胞直至细胞层分散(通常在5至15分钟内)。
4.加入6.0-8.0 mL完全生长培养基,轻轻吹打吸出细胞。
5.将适当等份的细胞悬浮液加入新培养瓶中。推荐接种2×103-6×103活细胞/ cm2
6.37℃孵育培养细胞,传代培养细胞密度在6-7×104细胞/ cm2之间。

推荐转染方法:阳离子聚合物转染

细胞转染步骤(Ultrafection2.0 , 以24孔板为例)

1.准备待转染细胞:按照WI-38细胞5×104/孔的密度接种于24孔板中,37 ℃培养过夜。
2.转染前30分钟,将待转细胞更换成新鲜培养基。
3.准备Ultrafection2.0/DNA复合物:将0.5 μg DNA溶于25 μL的无血清培养基中混匀,将1.5 μL Ultrafection2.0加入25 μL的无血清培养基中混匀两者混匀后室温孵育10分钟。
4.转染:将上述Ultrafection2.0/DNA复合物加入每孔细胞(含培养基450 μL),复合物占总体积的1/10,轻柔摇匀。37 ℃孵育24-48小时。必要时,转染6小时后可换新鲜培养基。

产品应用表现:FBS(Natocor)/Ultrafection2.0(4Abio)

SK-OV-3 Cells

  • 种属
  • 组织来源卵巢
  • 形态学特征上皮细胞
  • 培养特性贴壁生长           
推荐培养条件:McCoy's 5A+10%FBS

细胞传代培养步骤T-75培养瓶

1.移除并弃掉培养液。
2.用0.25%胰蛋白酶/0.53 mM EDTA溶液冲洗细胞层,以除去含胰蛋白酶抑制剂的痕量血清。
3.向培养瓶中加入2.0-3.0 mL胰蛋白酶EDTA溶液,并在倒置显微镜下观察细胞直至细胞层分散(通常在5至15分钟内)。
4.加入6.0-8.0 mL完全生长培养基,轻轻吹打吸出细胞。
5.将适当等份的细胞悬浮液加入新培养瓶中。推荐接种2×103-6×103活细胞/ cm2
6.37℃孵育培养细胞,传代培养细胞密度在6-7×104细胞/ cm2之间。

推荐转染方法:阳离子聚合物转染

细胞转染步骤(Ultrafection2.0 , 以24孔板为例)

1.准备待转染细胞:按照SK-OV-3细胞5×104/孔的密度接种于24孔板中,37 ℃培养过夜。
2.转染前30分钟,将待转细胞更换成新鲜培养基。
3.准备Ultrafection2.0/DNA复合物:将0.5 μg DNA溶于25 μL的无血清培养基中混匀,将1.5 μL Ultrafection2.0加入25 μL的无血清培养基中混匀两者混匀后室温孵育10分钟。
4.转染:将上述Ultrafection2.0/DNA复合物加入每孔细胞(含培养基450 μL),复合物占总体积的1/10,轻柔摇匀。37 ℃孵育24-48小时。必要时,转染6小时后可换新鲜培养基。

产品应用表现:FBS(Natocor)/Ultrafection2.0(4Abio)

HepG2 Cell

  • 种属
  • 组织来源肝脏
  • 形态学特征上皮细胞
  • 培养特性贴壁生长

                                                                                                 

推荐培养条件:MEM+10%FBS

细胞传代培养步骤T-75培养瓶

1.移除并弃掉培养液。
2.用0.25%胰蛋白酶/0.53 mM EDTA溶液冲洗细胞层,以除去含胰蛋白酶抑制剂的痕量血清。
3.向培养瓶中加入2.0-3.0 mL胰蛋白酶EDTA溶液,并在倒置显微镜下观察细胞直至细胞层分散(通常在5至15分钟内)。
4.加入6.0-8.0 mL完全生长培养基,轻轻吹打吸出细胞。
5.将适当等份的细胞悬浮液加入新培养瓶中。推荐接种2×103-6×103活细胞/ cm2
6.37℃孵育培养细胞,传代培养细胞密度在6-7×104细胞/ cm2之间。

推荐转染方法:阳离子聚合物转染

细胞转染步骤(Ultrafection2.0 , 以24孔板为例)

1.准备待转染细胞:按照HepG2细胞5×104/孔的密度接种于24孔板中,37 ℃培养过夜。
2.转染前30分钟,将待转细胞更换成新鲜培养基。
3.准备Ultrafection2.0/DNA复合物:将0.5 μg DNA溶于25 μL的无血清培养基中混匀,将1.5 μL Ultrafection2.0加入25 μL的无血清培养基中混匀两者混匀后室温孵育10分钟。
4.转染:将上述Ultrafection2.0/DNA复合物加入每孔细胞(含培养基450 μL),复合物占总体积的1/10,轻柔摇匀。37 ℃孵育24-48小时。必要时,转染6小时后可换新鲜培养基。

产品应用表现:FBS(Natocor)/Ultrafection2.0(4Abio)

THP-1 Cell

  • 种属
  • 组织来源外周血
  • 形态学特征单核细胞
  • 培养特性悬浮生长

                                                                                                 

推荐培养条件:RPMI1640+10%FBS

细胞培养步骤(T-75培养瓶)

1.接种细胞:2-4×105悬浮细胞/ mL。

2.细胞密度达8×105细胞/ mL进行继代培养(尽量不要超过1×106细胞/ mL)。

推荐转染方法:慢病毒转染/核转染
产品应用表现:FBS(Natocor)
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